Київ
Нозологічний довідник лікаря

Диагностика паразитарных инфекций

Содержание

Сбор и вид материала

При диагностике паразитарных инфекций важно точно определить способ и вид забора биологического материала, что зависит от клинической формы заболевания, предполагаемого возбудителя и выбранного метода исследования:

  1. Паразиты, извлеченные из организма:
    • членники цепня, аскариды, острицы: такие образцы следует доставить в лабораторию, поместив в контейнер с 0,9% раствором NaCl или 70% этиловым спиртом для сохранности.
  2. Свежий кал:
    • для стандартного исследования: собрать 3 образца кала (каждый размером с грецкий орех или около 1–2 мл жидкого кала) каждые 3–4 дня. Образцы помещаются в чистый, сухой пластиковый контейнер с плотно закрывающейся крышкой;
    • при подозрении на амебиаз или лямблиоз: необходимо исследовать 6 образцов кала, собранных ежедневно, с добавлением соответствующего консерванта для сохранения. В некоторых случаях кал собирают после применения слабительных средств, и тогда его нужно разместить в пронумерованные контейнеры.
  3. Мазок с перианального участка (для диагностики энтеробиоза):
    • процедура: мазок следует делать утром, сразу после пробуждения, до каких-либо гигиенических процедур. Использовать целлюлозную или самоклеящуюся ленту, которую прикладывают к коже вокруг ануса. Затем лента приклеивается непосредственно на предметное стекло;
    • частота: процедуру рекомендуется повторять трижды с интервалом в 2 дня, при этом не проводить сбор материала и исследование в один день.

Эти методы сбора образцов обеспечивают точное и эффективное диагностирование различных паразитарных инфекций, что очень важно для правильного назначения лечения и контроля над распространением заболеваний.

Для диагностики паразитарных инфекций, связанных с кровью, используются различные методы, зависящие от типа клетки или биологической жидкости.

Эритроциты:

  • материал: мазок крови или капля чистой крови;
  • методы подготовки:
    • тонкослойный препарат: позволяет выявить паразитов даже при низкой концентрации;
    • толстослойный препарат: используется для точной идентификации паразитов внутри эритроцитов;
  • транспортировка: материал должен быть доставлен в лабораторию как можно быстрее для предотвращения деградации;
  • цель исследования: диагностика таких паразитов, как:

Лейкоциты:

  • материал: цельная кровь, собранная в пробирки с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) или гепарином;
  • транспортировка: оптимально доставить образец в течение 30 мин после забора; наилучшие результаты достигаются при анализе крови без антикоагулянтов;
  • цель исследования: определение паразитов, которые могут локализоваться или взаимодействовать с лейкоцитами.

Сыворотка крови:

  • материал: сыворотка крови;
  • цель исследования: выявление специфических антител против паразитов, таких как Toxoplasma gondii или Leishmania, для подтверждения активной или перенесенной инфекции.

Эти методы в комплексе обеспечивают точную диагностику, что особенно важно для выбора эффективного лечения и мониторинга состояния пациента.

Для диагностики лейшманиоза с использованием костного мозга следует учитывать следующие аспекты:

Материал:

  • аспирированный материал из костного мозга;
  • поместить в стерильную пробирку без добавления антикоагулянтов (если материал будет исследоваться немедленно) или с антикоагулянтом (например ЭДТА), если предполагается задержка в анализе.

Цель диагностики: выявление Leishmania в клетках костного мозга, что характерно для висцерального лейшманиоза.

Методы исследования:

  1. Микроскопия:
    • изготовление мазков из аспирата костного мозга;
    • окраска мазков методом Романовского — Гимзе или для визуализации амастигот (внутриклеточных форм Leishmania).
  2. Культуральное исследование: бакпосев аспирата на специальные среды (например Novy-MacNeal-Nicolle — NNN) для культивирования Leishmania.
  3. Молекулярные методы: полимеразная цепная реакция (ПЦР) для определения ДНК Leishmania в материале.
  4. Серологические тесты: выявление антител против Leishmania в плазме крови, если костный мозг исследуется в комплексе с другими образцами.

Транспортировка:

  • материал должен быть доставлен в лабораторию как можно скорее;
  • если немедленная доставка невозможна, образец можно временно хранить в холодильнике при температуре +4 °C.

Эти шаги обеспечивают высокую точность диагностики лейшманиоза, особенно в случаях висцеральной формы заболевания.

Для диагностики паразитарных инфекций с использованием спинномозговой жидкости (СМЖ) необходимо соблюдать следующие рекомендации.

Сбор материала:

  • метод: жидкость получают с помощью люмбальной пункции;
  • упаковка: СМЖ сразу помещают в стерильную пробирку, избегая загрязнений.

Транспортировка:

  • время доставки: образец должен быть доставлен в лабораторию немедленно для предотвращения деградации и потери диагностической ценности;
  • условия хранения: при невозможности немедленного анализа хранить при температуре 4 °C (но не замораживать).

Цели диагностики

СМЖ исследуется для выявления следующих патогенов:

  • Naegleria fowleri, вызывающая первичный амебный менингоэнцефалит.

Диагностика: нативная микроскопия, культивирование или ПЦР.

  • Toxoplasma gondii — паразит, способный поражать центральную нервную систему.

Диагностика: ПЦР для выявления ДНК или серологическое выявление антител.

Диагностика: микроскопия нативного или окрашенного мазка СМЖ.

  • Acanthamoeba: связанная с гранулематозным амебным энцефалитом.

Диагностика: микроскопия, культивирование или молекулярные методы (ПЦР).

Методы исследования:

  • микроскопия: нативные препараты для немедленного анализа под микроскопом;
  • окраска препаратов по Романовскому — Гимзе или акридиновый оранжевый для повышения визуализации.

Культивирование:

  • использование специализированных сред (например для Naegleria и Acanthamoeba);
  • молекулярные тесты: ПЦР для точной идентификации патогенов;
  • серология: выявление антител против Toxoplasma gondii или других патогенов.

Эти шаги обеспечивают своевременную и точную диагностику, особенно при подозрении на редкие или опасные паразитарные инфекции центральной нервной системы.

Для диагностики паразитарных инфекций, таких как лейшманиоз (Leishmania) и амебиаз кожи (Entamoeba), при наличии язв кожи используются следующие подходы.

Сбор материала:

  • аспирация материала: выполнить аспирацию содержимого язвы;
  • поместить полученный материал в стерильную пробирку;
  • биоптат: взять биопсию ткани из области язвы;
  • изготовить высушенный мазок на предметном стекле, чтобы предотвратить деградацию образца.

Цели диагностики:

  • Leishmania: выявление амастигот (внутриклеточных форм) Leishmania в материалах язвы;
  • Entamoeba: выявление трофозоитов Entamoeba в аспирационном материале или биоптате.

Методы исследования:

  • микроскопия: окрашивание мазков методом Романовского — Гимзе или для выявления внутриклеточных амастигот Leishmania;
  • использовать нативный препарат или окраску для определения трофозоитов Entamoeba.

Культивирование:

  • материал можно посеять на специальные среды для выращивания Leishmania (например NNN) или Entamoeba;
  • молекулярные методы: ПЦР для точной идентификации ДНК Leishmania или Entamoeba.

Серология: выявление антител к Leishmania при системной инфекции.

Транспортировка:

  • аспирационный материал: доставить в лабораторию как можно быстрее, предпочтительно в течение 1–2 ч;
  • биоптаты: высушенные мазки можно хранить дольше, но их следует передать для анализа в ближайшее время.

Эти методы обеспечивают точное выявление и идентификацию возбудителей, что важно для постановки диагноза и начала лечения.

Глаз:

  • материал: биоптат, соскоб с роговицы, контактная линза;
  • хранение: поместить в стерильную пробирку с 0,9% NaCl;
  • цель диагностики: выявление Acanthamoeba, Naegleria, Microsporidia;
  • методы: микроскопия, культивирование на специфических средах, ПЦР.

Желудочно-кишечный тракт.

Свежий кал:

  • сбор: в чистый, сухой (желательно стерильный) контейнер;
  • транспортировка: немедленно; для культивации — в течение 24 ч;
  • паразиты: Entamoeba, Giardia duodenalis, Balantidium coli, Ascaris lumbricoides, Enterobius vermicularis, Taenia solium/saginata, Strongyloides stercoralis, Cryptosporidium parvum.

Хранение кала:

  • сбор: в стерильный контейнер;
  • консервант: 5% формалин для сохранения.

Биоптат (дуоденоскопия, колоноскопия):

  • сбор: в стерильный контейнер;
  • консервант: добавить соответствующий фиксатор.

Мазок из ануса: использование целлюлозной ленты для диагностики (например Enterobius vermicularis).

Фрагмент паразита:

  • сбор: в контейнер с 0,9% NaCl или 70% спиртом;
  • транспортировка: в консерванте для исследования.

Содержимое двенадцатиперстной кишки:

  • сбор: в стерильный контейнер;
  • транспортировка: немедленно.

Печень, селезенка:

  • материал: аспират, биоптат;
  • хранение: стерильный контейнер;
  • транспортировка: немедленно при комнатной температуре (для культивации);
  • паразиты: Echinococcus, Entamoeba histolytica, Fasciola hepatica.

Легкие:

  • мокрота:
    • контейнер: стерильный;
    • транспортировка: немедленно, при комнатной температуре;
  • бронхоальвеолярный лаваж:
    • контейнер: стерильный;
  • материал, аспирированный из бронхов:
    • контейнер: стерильный;
  • материал, аспирированный из плевральной полости:
    • контейнер: стерильный;
  • биоптат легкого:
    • контейнер: стерильный с 0,9% NaCl.

Мышцы:

  • материал: биоптат;
  • подготовка: нативный мазок; мазки после пищеварения ткани;
  • паразиты: Taenia solium (цистицерк), Trichinella spiralis, Trypanosoma cruzi, Microsporidia.

Кожа:

  • соскоб:
    • образцы готовятся как для гистологических исследований;
    • хранение: стерильная пробирка с 0,9% NaCl;
  • биоптаты: используются для более глубокого анализа;
  • паразиты: Leishmania, микрофилярии.

Мочеполовая система

Выделения из влагалища:

  • сбор: зонд-тампон, увлажненный 0,9% NaCl;
  • исследования: анализ осадка, культивация;
  • паразиты: Trichomonas vaginalis, Microsporidia.

Выделения из уретры: используются для микроскопии и культивации.

Секрет предстательной железы: сбор при подозрении на инфекции.

Моча:

  • контейнер: чистый;
  • применяется для микроскопии и анализа.

Хранение и транспортировка образцов

При хранении и транспортировке образцов для паразитологических исследований требуется особое внимание, поскольку многие диагностические тесты включают микроскопический анализ, который зависит от сохранности и качества биологического материала. Вот ключевые рекомендации по обработке и хранению образцов:

  1. Мазки на стеклышках: большинство образцов для микроскопии в виде мазков на предметных стеклах. Это может включать использование специальных консервирующих веществ, которые помогают сохранить морфологическую структуру паразитов.
  2. Свежие образцы для выявления трофозоитов: если целью является идентификация активных форм паразитов, таких как трофозоиты Giardia intestinalis или Trichomonas vaginalis, образец необходимо перенести в лабораторию сразу после сбора (в течение 15 мин) и в неохлажденном состоянии, так как эти организмы чувствительны к температурным изменениям.
  3. Образцы кала с консервантом: в случаях, когда предполагаются более длительное хранение или транспортировка, образцы кала рекомендуется поместить в контейнер с жидким консервантом, таким как 10% раствор формалина или поливиниловый спирт. Это помогает сохранить паразитарные элементы для последующего анализа.
  4. Хранение при низкой температуре: образцы, содержащиеся в консервирующих средах, следует хранить в холодильнике при температуре около 4 °C, чтобы предотвратить разложение.
  5. Заморозка образцов: повторная заморозка и размораживание образцов кала категорически не рекомендуются, поскольку это может привести к разрушению паразитарных структур и потере диагностической ценности.

Эти меры предосторожности помогают обеспечить доставку образцов в лабораторию в оптимальном состоянии для точного диагностического анализа.

Методы идентификации паразитов

Микроскопическое исследование является центральным методом в диагностике паразитарных инфекций, и различаются два основных типа подготовки образцов:

  1. Неокрашенные препараты:
    • эти препараты используются для быстрой и непосредственной диагностики различных паразитарных заболеваний;
    • примеры применения включают диагностику амебиаза и лямблиоза, используя анализ свежего кала, а также трихомониаза, используя анализ выделений из влагалища или уретры;
    • с помощью неокрашенных препаратов возможно наблюдать живые организмы в их естественном состоянии, что может быть критично для точной идентификации.
  2. Окрашенные препараты:
    • окрашивание препаратов улучшает визуализацию и позволяет более точно определить структурные характеристики паразитов;
    • для диагностики криптоспоридиоза используется окраска по Цилю — Нильсену препарата кала;
    • малярия диагностируется с помощью окраски препаратов капиллярной крови методом Романовского — Гимзе;
    • пневмоцистоз обычно диагностируется с помощью серебрения или окраски смывов по методу Романовского — Гимзе.

Культивация:

  • этот метод применяется реже и в основном в специализированных лабораториях;
  • культивация проводится на специальных средах, обычно жидких, что позволяет выявить такие паразиты, как Acanthamoeba, Toxoplasma, Trypanosoma и Leishmania;
  • при культивации требуются более сложные и дорогие установки, но это позволяет точно идентифицировать паразита по его росту и размножению в контролируемых условиях.

Каждый из этих методов имеет свои преимущества и недостатки и выбор метода зависит от конкретных клинических потребностей, доступности ресурсов и требуемой точности диагностики.

Серологические и молекулярные методы играют важную роль в диагностике паразитарных инфекций, особенно когда с помощью других методов исследования невозможно получить достаточной информации.

Серологические методы:

  1. Определение антигенов паразитов:
    • используется для выявления паразитарных антигенов в клинических образцах, таких как кал, моча или другие биологические жидкости;
    • примеры применения: диагностика амебиаза и криптоспоридиоза.
  2. Определение специфических антител:
    • этот метод позволяет выявить антитела, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, что особенно важно при хронических или латентных формах заболеваний;
    • примеры:
      • диагностика токсоплазмоза, трихинеллеза и цистицеркоза с использованием анализа сыворотки крови;
      • выявление антител в СМЖ при подозрении на нейроцистицеркоз или другие поражения центральной нервной системы.

ПЦР:

  1. Принцип работы: ПЦР используется для выявления генетического материала паразитов в клинических образцах. Это метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, что делает его незаменимым для точной идентификации паразитов.
  2. Примеры применения:
    • диагностика токсоплазмоза путем выявления ДНК Toxoplasma gondii;
    • определение пневмоцистоза через идентификацию ДНК Pneumocystis jirovecii.

Эти методы особенно эффективны для диагностики труднодиагностируемых инфекций, а также для мониторинга лечения и выявления остаточной инфекции. Благодаря высокой точности они становятся все более востребованными в клинической практике.

ГоловнаКошикОбране