Значение рецепторов эстрогена и прогестерона в клетках рака молочной железы. Методы их определения (5000162558)
Экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона в опухолевых клетках РМЖ коррелирует с гистологической дифференцировкой опухоли и ответом на гормональную терапию, особенно у пациенток в постменопаузальный период [90].
S.M. Veronese и соавторы исследовали 257 больных с РМЖ и установили, что опухоли с рецептором эстрогена (ЭR+) протекают более благоприятно с высокой общей и безрецидивной выживаемостью. Однако прогностическое значение рецептора эстрогена утрачивалось у пациенток, не получающих тамоксифен, а прошедших лечение химиотерапией [91].
По данным литературы положительный эффект гормональной терапии отмечали в 77% случаев РМЖ ЭR+/ПР+ (эстрогена рецептор+/прогестерона рецептор+), в 27% — с раком ЭR+/ПР-, в 46% — с раком ЕR-/ПР+, в 11% — с раком ЕR-/ПР-. Необходимо отметить, что 33% пациенток с РМЖ с положительным гормональным статусом не отвечали на гормональную терапию [92–96]. В какой-то степени неожиданный ответ на гормональную терапию может быть объяснен тем, что большая часть данных базируется на исследовании рецепторов эстрогена и прогестерона биохимическим методом, который не позволяет оценить рецепторы гормонов только в клетках опухоли. Этот метод определяет наличие рецепторов гормонов во всем тканевом кусочке, в том числе в строме и нормальных протоках молочной железы. Применение иммуногистохимического метода исследования позволяет избежать этого, так как исследуется тканевой срез с визуальной окраской структуры ткани и локализации рецепторов эстрогена и прогестерона. Использование моноклональных антител второго поколения, работающих на парафиновых срезах, а также антигенвосстанавливающей техники демаскировки позволило значительно повысить чувствительность метода. Результаты сравнительных исследований биохимического и иммуногистохимического методов исследования показали высокую зависимость между ними и более выраженную специфичность последнего метода [97—104].Тем не менее иммуногистохимический метод исследования более сложный в выполнении и оценке реакции. В обзоре литературы АСКО за 1995 г. сделано заключение, что рецепторы эстрогена и прогестерона должны исследоваться не только в первичной опухоли, но и метастазе, причем результаты исследования метастаза более информативны для оценки прогноза отклика на гормональную терапию [102]. Также отмечено, что для оценки иммуногистохимической реакции не имеет значение интенсивность окраски, важен только факт позитивного окрашивания (фото 92, 93).
![](https://compendium.com.ua/wp/wp-content/uploads/2020/11/Photo91.jpg)
Фото 91. Экспрессия Estrogen receptor (клон 1D5, производство DAKO). Иммуногистохимическое окрашивание, система визуализации EnVision, хромоген DAB, х 400
![](https://compendium.com.ua/wp/wp-content/uploads/2020/11/Photo92.jpg)
Фото 92. Экспрессия Progesteron receptor (клон 636, производство DAKO). Иммуногистохимическое окрашивание, система визуализации EnVision, хромоген DAB.. Увел. Х 400
![](https://compendium.com.ua/wp/wp-content/uploads/2020/11/Photo93.jpg)
Фото 93. Экспрессия HER-2/neu (C-erB-2 Oncoprotein), клон СВ11, производство ДАКО Progesteron receptor (клон 636, производство DAKO). Иммуногистохимическое окрашивание, система визуализации EnVision, хромоген DAB, х 400
Какие же требования необходимо соблюдать при проведении иммуногистохимического исследования?
Прежде всего правильный подбор моноклонального антитела для исследования на парафиновом или замороженном срезе, использование адекватной и высокочувствительной системы визуализации, соблюдение необходимой рН среды, для чего желательно закупать готовые буферы. Обязательным условием является использование позитивных и негативных контролей для проверки работы реактивов. Для позитивного контроля рекомендовано выбирать опухоли с умеренной позитивностью. Оценивается окрашивание только ядер опухолевых клеток, окраска цитоплазмы при правильном проведении реакции должна отсутствовать [104–105].
Как оценивать результат иммуногистохимической реакции?
Н. Battifora и соавторы установили, что если более 5% опухолевых клеток имеют окрашивание ядер любой интенсивности, то реакция считается позитивной [97]. Большинство исследователей более значимым считают окрашивание 10% опухолевых клеток, при этом не оценивают интенсивность окраски [101]. D.C. Wilbur и соавторы предлагают полуколичественный метод оценки реакции — HSCORE-метод. В нем используется формула, расчет которой базируется на проценте клеток с окрашенными ядрами и интенсивности окрашивания.
HSCORE=3(% клеток с интенсивно окрашенными ядрами) = 2 (% клеток с умеренно окрашенными ядрами) + 1 (% клеток со слабо окрашенными ядрами).
В исследовании D.C. Wilbur и соавторов результаты HSCORE считаются позитивными в отношении рецепторов эстрогена при уровне ≤ 20, а в отношении рецептора прогестерона равном — 5. Можно использовать различные методы оценки результатов реакции, мы предпочитаем определять процент клеток с окрашенными ядрами и указывать интенсивность окраски от одного до трех плюсов (1+ — слабое, 2+ — умеренное, 3+ — выраженное окрашивание). Положительной реакция считается при наличии 10% и более опухолевых клеток.